所報 104

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－　　－27Published PaperUse of a Highly Sensitive Latex Reagent with Amino Acid Spacer for Determination of C-reactive Protein Concentration in a Variety of Liver DiseasesTomoe KOMORIYA, Naoko INOUE, Kazuaki YOSHIMUNE, Masahiro OGAWA, Mitsuhiko MORIYAMA, Hideki KOHNOC-reactive protein (CRP) is a major acute-phase protein, which is extremely important in inflammatory disease diagnosis. CRP is rapidly elevated in various diseases as a result of tissue injury, infection and inflammation. Recently, many reports have shown its usefulness as a risk marker for arteriosclerosis and metabolic syndrome. However, the lack of sensitivity of existing CRP assays has hampered CRP testing in conditions associated with viral infections, where CRP levels typically elevate only marginally. In this report, we prepared a novel, ultra-sensitive latex-based CRP test using amino acid spacers with a high sensitivity and a wider assay range. Our method of conjugating latex beads enabled us to measure CRP in the range of 5e500 ng/mL in patient sera. Furthermore, we studied CRP levels in patients with various liver diseases, such as chronic hepatitis, liver cirrhosis and hepatic carcinoma, in order to examine the correlation between severity of liver dysfunction and CRP levels, and to examine the likelihood of recurrence of liver dysfunction. The reagent was simple to prepare and sensitive during clinical investigation, where it discriminated clearly between normal subjects and those with liver diseases. Therefore, we conclude that our ultra-sensitive CRP assay will contribute greatly to the clinical study of hepatic disorders.Keywords: Latex reagent, CRP (C-reactive protein), Immunoassay, liver diseasesさまざまな肝疾患におけるCRP濃度測定のためのアミノ酸スペーサーを用いた高感度ラテックス試薬の利用　本研究では，高感度で広い測定範囲能を持つアミノ酸スペーサーを使用した新しい超高感度CRPラテックス試薬を作製し，その試薬を利用して肝機能障害の重症度とCRP濃度の相関関係を調査することにより，高感度なラテックス試薬の必要性と有用性を報告した．C反応性タンパク質（CRP）は主要な急性期タンパク質であり，組織の損傷，感染，炎症などのさまざまな疾患で急激に上昇する．さらに，動脈硬化とメタボリックシンドロームのリスクマーカーとしての有用性が近年報告されている．しかし，既存のCRP測定試薬の検出感度が低いことから，CRP濃度がわずかにしか上昇しないウイルス感染においてCRP測定は行われていない．そのため，本研究では，高感度で広い測定範囲能を持つアミノ酸スペーサーを使用した新しい超高感度CRPラテックス試薬を作製し，肝機能障害の重症度とCRP濃度の相関関係を調査した．本研究で作製されたラテックス試薬は，患者の血清中の5-500 ng / mLの範囲でCRP濃度を測定することができた．さらに，慢性肝炎，肝硬変，肝癌などのさまざまな肝疾患の患者のCRPレベルを作製した試薬で測定し，肝機能障害の重症度とCRPレベルの相関関係を調査した．この試薬は、測定方法が簡便であり，さらに高感度な検出能を有することにより，正常な被験者と肝疾患のある被験者を明確に区別することができた．よって，超高感度CRPラテックス試薬は，肝障害の臨床研究への貢献が期待できる．キーワード：ラテックス試薬，CRP(C反応性タンパク質)，イムノアッセイ，肝疾患Journal（掲載誌）JBB (Journal of Bioscience and Bioengineering) Vol. 114, No. 5, 560-563, Jun 2012